概要?
乳鐵蛋白(lactoferrin，LF)是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結(jié)合糖蛋白，中性粒細(xì)胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。 乳鐵蛋白不僅參與鐵的轉(zhuǎn)運(yùn)，而且具有廣譜抗菌、抗氧化、抗 癌、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等強(qiáng)大生物功能，被認(rèn)為是一種新型抗菌、 抗癌藥物和極具開發(fā)潛力的食品和飼料添加劑。?
本試劑盒是應(yīng)用 ELISA 技術(shù)研發(fā)的新一代牛乳鐵蛋白檢測(cè)產(chǎn)品，操作時(shí)間需 45min，能減少操作誤差和工作強(qiáng)度。?
實(shí)驗(yàn)原理?
牛乳鐵蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 方法，在酶標(biāo)微孔上預(yù)包被牛乳鐵蛋白抗體，預(yù)包被的牛乳鐵蛋白抗體與酶標(biāo)抗體 （酶標(biāo)物）同時(shí)與樣本中的牛乳鐵蛋白結(jié)合，形成抗體—牛乳鐵蛋白—酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng) TMB 底物顯色，樣本吸光值與牛乳鐵蛋白的含量呈正相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣本中牛乳鐵蛋白的含量。?
適用范圍?
牛乳鐵蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒可定性、定量檢測(cè)奶粉樣本中牛乳鐵蛋白的含量。
貯藏條件及有效期?
貯藏條件：保存試劑盒于 2～8℃。?
有效期：該產(chǎn)品有效期為 12 個(gè)月。
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25℃）平 衡 1 小時(shí)或 37℃溫箱平衡 30min 以上，注意每種液體試劑 使用前均須完全溶解搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于 2～8℃。切勿 冷凍。?
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo) 準(zhǔn)品做 2 孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加牛乳鐵蛋白酶標(biāo)物 50μL/孔到對(duì)應(yīng)的微 孔中，再加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本 50μL/孔。輕輕振蕩混勻，用 蓋板膜蓋板后置 37℃避光環(huán)境中反應(yīng) 15min。?
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌液 250μL/ 孔，充分洗滌 4~5 次，每次間隔 10s，用吸水紙拍干（拍 干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。
7、顯色：加入底物液 A 液 50μL/孔，再加入底物液 B 液 50μL/ 孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置 37℃避光環(huán)境中反 應(yīng) 10min。?
8、測(cè)定：加入終止液 50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀 于 450nm 處（建議用雙波長(zhǎng) 450/630nm 檢測(cè)，請(qǐng)?jiān)?5min 內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定每孔 OD 值。
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