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河豚毒素5種檢測方法詳解，從“拼死吃”到放心吃！

2021-03-29 15:30瀏覽量：1760

“春江水暖鴨先知，正是河豚欲上時?！泵慨敶号ㄩ_之計，河豚逆流而上，從大海游回江河， 2月到5月是河豚魚最肥美的時節，也是河豚毒素最強的季節。

作為“天下第一鮮”的河豚，食客中毒身亡的事件屢屢發生，河豚毒素為自然界最強毒素之一，220攝氏度以上才能分解。毒性相當于砒霜的1250倍，只需要0.48毫克就能致人死命。其毒素主要有河豚毒和河豚酸兩種，屬于神經毒素的一種，嘔吐、神經麻痹、四肢發冷，進而心跳和呼吸停止。

我國《水產品衛生管理辦法》明確規定：河豚魚有劇毒，不得流入市場，這使河豚毒素的檢測越來越為人們所重視。

河豚毒素的限量標準：檢出限為0.1mg/kg，定量限為0.25mg/kg。

國標 GB5009.206—2016《水產品中河豚毒素的測定》規定了4種測定方法，今天，我們美正檢測團隊給大家詳細分享河豚毒素常用5種檢測方法及操作流程，主要適用于河豚魚肌肉、肝臟、皮膚和性腺組織中河豚毒素的測定。

1?小鼠生物法

是最原始、最直觀的檢測方法，通過小鼠死亡前所呈現出的典型的河豚毒素中毒癥狀，可迅速地將河豚毒素與其它致死性物質區分開。其原理是，根據小鼠注射試樣提取液后的死亡時間，查出鼠單位，并按照小鼠體重校正單位，計算確定河豚毒素含量。此方法測得的毒力用小鼠單位來表示。

優點：小鼠法不需要特殊裝置，操作簡便，適用于基層檢驗。

缺點：計算方式復雜，重復性差、費時費力，個體差異大、重現性不好，而且需有一定規模才能客觀反映實驗結果。

2?液相色譜-串聯質譜法

試樣經提取后利用免疫親和柱凈化，利用液相色譜將混合物進行分離，對分離的組分進行質譜檢測，能同時進行定性定量分析。外標法定量，本方法的檢測限為1μg/kg，定量限為３μg/kg。

優點：靈敏性高，對樣品的適用性廣，不需要衍生化，大大簡化了分析工作量。能準確的定量分析河豚毒素，分析結果具權威性。

缺點：分析時間長、分析過程復雜、檢測費用高、專用儀器昂貴、對樣品的純度要求較高。

3?液相色譜-熒光檢測法

試樣經提取后利用免疫親和柱凈化，液相色譜——柱后衍生熒光法測定，以保留時間定性，外標法定量。本方法的檢測限為50μg/kg，定量限為150μg/kg。

優點：較其他方法靈敏度高，較液相色譜-串聯質譜法靈敏度低，對樣品的適用性廣。

缺點：ＴTX沒有熒光吸收，必須先要衍生化成具有熒光吸收的物質，需衍生裝置，操作比較繁瑣。

4?酶聯免疫吸附法(ELISA)

試樣中的河豚毒素經提取、脫脂后與一定量的固相抗原競爭結合一定量的抗體，加入酶標二抗反應，最后加入顯色液，顯色深淺與試樣中待測河豚毒素含量呈負相關，試樣中河豚毒素含量越高，顯色越淺。

優點：酶聯免疫吸附法快速、靈敏，不需要復雜和昂貴的儀器，可以實現大量樣本的初篩工作，滿足現場工作的需要。

缺點：嚴格來講，此方法為半定量檢測。

5?膠體金法

試樣經提取液提取，離心后取上清待測。其原理為待測液中的抗原與NC膜上的預劃的抗原競爭結合一定量的抗體，導致CT線呈現出不同的顯色水平。將待測液滴加至檢測卡的加樣孔中，一定時間后根據CT線的顯色情況進行檢測結果的判讀。

優點：檢測方便，耗時短，效率高，單個樣本檢測僅需10-15min，可以滿足大量樣本的初篩工作。

缺點：檢測結果為定性判讀，無法得到具體含量數值。

除上面常規的檢測方法外，國內報道的還有分光光度計法、薄層層析法、高效毛細管區帶電泳法等方法。這些方法準確度不高，操作相對復雜。國外也有柱轉換液相色譜/質譜/電噴霧法、薄層層析/快原子轟擊質譜法、親水作用色譜-電噴霧質譜法、電噴霧離子化質譜法等方法的報道，這些方法所需儀器設備都昂貴，也不便于普遍推廣。

目前河豚毒素的檢測方法多種多樣，各有優缺點，大家應根據需要選擇合適的檢測方法。

說到這里，美正檢測用實力說話！我們具有進行河豚毒素檢測能力的資質，通過了CNAS實驗室認可及CMA資質認定。

美正在河豚毒素檢測中不僅可為廣大客戶提供第三方檢測服務還可以提供高品質的河豚毒素的標準品和陽性質控樣品以及前處理所需的河豚毒素免疫親和柱等相關耗材。在快速檢測方面美正也可提供河豚毒素ELISA檢測試劑盒，為河豚生鮮的快速入市提供安全保障。