ELISA试剂盒-检测试纸条-快速检测卡-山东美正生物科技有限公司

黃曲霉毒素是一類主要由黃曲霉菌和寄生曲霉菌相互作用產生的次級代謝產物，包括黃曲霉毒素B1(AFB1）、黃曲霉毒素B2(AFB2）、黃曲霉毒素G1(AFG1）、黃曲霉毒素G2(AFG2）、黃曲霉毒素M1(AFM1）、黃曲霉毒素M2(AFM2）等，中藥材中主要含有AFB1、AFB2、AFG1、AFG24種，其中AFB1因其致癌、致畸、致毒性較強被國際癌癥研究機構（IARC）列為Ⅰ級強致癌物。

由于中藥基質復雜，以決明子為例，如果按照藥典方法單獨使用免疫親和柱凈化，決明子的基質抑制效應較大，易造成低濃度目標物無法檢出，從而不能對其中的黃曲霉毒素含量進行準確測定。

因此，美正針對中藥材中黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2的檢測推出了新的整體解決方案。

本實驗過程采用凈化柱結合黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2免疫親和柱方式進行除雜凈化，可有效降低基質效應的影響，且結果穩定，減少了對儀器設備和色譜柱的污染，為客戶提供了更高效的處理方法。

方法摘要

本實驗采用凈化柱結合黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2免疫親和柱建立了決明子中黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2的前處理方法。樣品經甲醇溶液提取，凈化柱除雜，再通過黃曲霉毒素免疫親和柱凈化富集，LC-MS/MS檢測，外標法進行定量。結果表明，當黃曲霉毒素B1/G1添加量為5 μg/kg，黃曲霉毒素B2/G2添加量為1.5 μg/kg時，黃曲霉毒素的回收率均在90% ~ 120%。

實驗流程

色譜條件

色譜柱：五氟苯基鍵合色譜柱（或其他等效色譜柱），2.6 μm，3.0 × 50 mm；

流動相A：10 mmol/L乙酸銨；

流動相B：甲醇；

柱 ?溫：40℃；

進樣量：10 μL；

梯度洗脫：

液相色譜梯度洗脫條件

質譜條件

離子源：ESI+；

霧化氣：200；

電噴霧電壓：4500 V；

離子源溫度：275℃；

反吹氣：80；

質譜接口溫度：250℃；

采集方式：多反應監測(MRM)。

質譜參數

實驗結果

決明子基質加標回收實驗結果

決明子基質5?μg/kg加標色譜圖（以AFT B1計）

結論

美正使用凈化柱結合黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2免疫親和柱建立了決明子中黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2的前處理方法，并對加標量為5 μg/kg的決明子樣品進行了檢測。

結果表明，先用凈化柱除雜，再使用黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2免疫親和柱進行處理，黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2回收率滿足要求且變異系數小于15%。

如果直接使用藥典方法，基質效應較大，因此使用凈化柱除雜后再通過免疫親和柱凈化，可有效降低基質效應影響，減少儀器設備和色譜柱的污染，更適用于在液相色譜串聯質譜上檢測決明子中黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2，且方法穩定。

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