2023-12-20 17:37瀏覽量:330
黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條檢測原理
黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條采用熒光側(cè)向免疫層析(Fluorescent Lateral Flow,FLF)方法學(xué)原理。當(dāng)將待測樣品滴加在加樣區(qū)時(shí),樣品中的黃曲霉毒素B1與結(jié)合墊中的熒光微球標(biāo)記黃曲霉毒素M1抗體結(jié)合并通過毛細(xì)作用向前層析,達(dá)到檢測區(qū)后,檢測線T線上固定的黃曲霉毒素M1抗原與剩余未結(jié)合的熒光微球標(biāo)記黃曲霉毒素M1抗體結(jié)合。檢測線T線上結(jié)合的熒光微球標(biāo)記黃曲霉毒素B1抗體的量與樣品中黃曲霉毒素M1的濃度成反比,質(zhì)控線C線結(jié)合的熒光標(biāo)記物與樣品中黃曲霉毒素M1的濃度無關(guān)。層析結(jié)束后,采用熒光讀數(shù)儀的讀取T線和C線的熒光強(qiáng)度并計(jì)算T/C值,通過儀器內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣品中黃曲霉毒素M1的含量并判斷陰陽性。
黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條適用范圍?
黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條適用樣本:小麥/面粉、玉米、部分成品飼料、豆瓣醬、植物油
黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條通常由以下組成部分構(gòu)成:
熒光染料:熒光染料是測試條的核心成分,它可以與黃曲霉毒素B1發(fā)生特異的結(jié)合反應(yīng),并在激發(fā)光的作用下產(chǎn)生熒光。
樣品反應(yīng)內(nèi)部裝置:熒光試紙上的樣品反應(yīng)內(nèi)部裝置主要包括濾紙、吸附材料等。它們的作用是將待測樣品與熒光染料有效地接觸并進(jìn)行反應(yīng)。
取樣窗口:取樣窗口是測試條上的一個(gè)小孔,用于將待測樣品添加到測試條中,與內(nèi)部裝置接觸。
標(biāo)定線:標(biāo)定線是用于評(píng)估樣品中黃曲霉毒素B1含量的參考線。當(dāng)樣品中黃曲霉毒素B1的濃度達(dá)到或超過標(biāo)定線時(shí),與熒光染料發(fā)生結(jié)合的熒光信號(hào)減弱。
測量窗口:測量窗口是用于讀取測試結(jié)果的區(qū)域,它可以通過專門的讀取儀器或設(shè)備來測量和解讀樣品中黃曲霉毒素B1的含量。
需要注意的是,不同廠家生產(chǎn)的黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條可能具有不同的組成和設(shè)計(jì)。因此,在使用時(shí)應(yīng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書并按照使用指南進(jìn)行操作。
黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條的檢測步驟一般如下:
樣品準(zhǔn)備:將待測樣品(如食物、飼料等)進(jìn)行處理和提取,通常使用適當(dāng)?shù)奶崛∫簩悠分械狞S曲霉毒素B1溶解出來。樣品處理的方法可以根據(jù)具體需求和實(shí)驗(yàn)室的要求來選擇。
取樣:使用吸管或移液器將樣品提取液取出一定量,滴于試紙的取樣窗口上。注意避免不必要的污染和交叉污染。
反應(yīng)發(fā)生:當(dāng)樣品與試紙上的內(nèi)部裝置接觸時(shí),取樣窗口上的熒光染料與樣品中的黃曲霉毒素B1發(fā)生特異的結(jié)合反應(yīng)。這個(gè)過程會(huì)在一定時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。
讀取信號(hào):將試紙放入配套的熒光試紙讀取儀器中,激發(fā)光照射下,讀取儀器會(huì)測量取樣窗口上熒光信號(hào)的強(qiáng)度并轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào)。
分析結(jié)果:根據(jù)讀取儀器輸出的數(shù)字信號(hào),結(jié)合預(yù)先建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線和已知濃度的對(duì)照樣品,計(jì)算出樣品中黃曲霉毒素B1的濃度。一般讀取儀器會(huì)提供數(shù)據(jù)處理軟件,可以快速計(jì)算結(jié)果。
在整個(gè)檢測過程中,需要注意以下幾點(diǎn):
遵循使用說明:根據(jù)試紙和讀取儀器的使用說明,正確操作和處理樣品、試紙以及讀取儀器。
控制質(zhì)量:使用合適的對(duì)照樣品進(jìn)行質(zhì)量控制,確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
避免污染:嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程,避免樣品交叉污染和試劑污染。
重復(fù)測試:為了提高結(jié)果的可信度,建議進(jìn)行重復(fù)測試,可根據(jù)需求進(jìn)行必要次數(shù)的測試。
以上是黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條的一般檢測步驟,具體的步驟可能會(huì)略有差異,根據(jù)使用的試紙和讀取儀器的不同,操作方法可能有所調(diào)整,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況參考相應(yīng)的技術(shù)文檔和使用說明。同時(shí),在實(shí)驗(yàn)操作過程中,遵守實(shí)驗(yàn)室的安全規(guī)范,采取適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)措施,確保操作的安全性。
黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條儲(chǔ)存及有效期
1.檢測試紙條與微孔應(yīng)儲(chǔ)存于 2~8℃、陰涼避光干燥處,切勿冷凍;
2.本產(chǎn)品有效期為 12 個(gè)月;
3.有效期及批號(hào)見外包裝。
黃曲霉毒素B1熒光定量檢測試紙條注意事項(xiàng)
1. 檢測試紙條請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用,使用前將試紙條和待檢樣本恢復(fù)至室溫。 2. 檢測過程中請(qǐng)勿觸摸試紙條中央的白色膜面,如不小心接 觸后請(qǐng)遺棄。 3. 槍頭與離心管等耗材不可混用,以免交叉污染。 4. 樣品要與微孔中試劑充分混合均勻,避免產(chǎn)生泡沫。 5. 孵育后,務(wù)必立即去掉試紙條下端的樣品墊,并在 1min 內(nèi)讀取結(jié)果。 6. 儀器讀取結(jié)果必須使用配套讀數(shù)儀和樣品卡槽(卡槽需定 期用水清洗擦干)。 7. 試劑從試劑桶取出后,請(qǐng)立即蓋好桶蓋,避免剩余試劑吸 潮。 8. 如發(fā)現(xiàn)陽性檢測結(jié)果,檢測結(jié)果需要使用法定的確證方法 進(jìn)行確證。 9. 除小麥/面粉、玉米、豆瓣醬、植物油之外,其他樣本用飼料曲線。 10. 部分樣本的提取上清液 pH 值呈酸性(pH<5)時(shí),需使 用 2.0 mol/L 的 NaOH 溶液調(diào)節(jié)上清液 pH=6.0~8.0 后再稀釋、混勻、檢測。 11. 試驗(yàn)遇到的任何問題,請(qǐng)與供應(yīng)商聯(lián)系。
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