ELISA试剂盒-检测试纸条-快速检测卡-山东美正生物科技有限公司

孔雀石綠ELISA快速檢測試劑盒介紹

孔雀石綠在水產中曾廣泛應用作為抗菌劑和防真菌劑，特別是在魚蝦養殖業。它可以用于治療或防止魚蝦疾病，并促進生長。

然而，盡管孔雀石綠在水產業有一定的應用價值，但由于其潛在的危害性，許多國家和地區已經禁止或限制其使用。

孔雀石綠屬于有機染料，具有強烈的毒性。以下是一些可能的危害：

1. 環境污染：過量使用或不當處理孔雀石綠的廢水會直接排放到水體中，對水生生物和整個生態系統造成污染。

2. 防藥物殘留：孔雀石綠具有持久性和穩定性，容易在水產中殘留，長期食用受污染的水產品可能對人體健康造成潛在風險。

3. 抗藥性產生：頻繁使用孔雀石綠可能導致病原菌產生耐藥性，對其他藥物的治療也產生耐藥性，使得治療更困難。

出于對環境和人類健康的考慮，越來越多的國家和地區已經禁止了孔雀石綠的使用。目前許多國家已經建立了嚴格的監測體系，確保水產品質量和安全。

孔雀石綠ELISA快速檢測試劑盒原理

采用回接競爭ELISA方法，在酸標板做孔上項包被孔雀 石綠抗原，樣本中孔雀石綠和此抗原競爭孔雀石綠抗體(抗試 劑)，加入酶標二抗《酶標物〉與孔雀石綠抗體相結合，經 TMB 底物顯色，樣本吸光值與孔雀石綠含量呈負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣本中孔雀石綠的含量。

孔雀石綠ELISA快速檢測試劑盒用途

可定性、定量檢測組織魚肉、蝦肉、水樣中孔雀石綠、隱性孔雀石綠、結品紫和隱性結晶紫的含量。

孔雀石綠ELISA快速檢測試劑盒參數

試劑盒靈敏度：0.03ppb?

樣本最低檢測限：?

組織——0.1ppb?

水樣——0.3ppb?

回收率：?

組織——90±20%?

水樣——100±20%?

精密度：試劑盒的變異系數均小于 10%

孔雀石綠ELISA快速檢測試劑盒樣本處理

樣本處理前須知

• (a) 實驗中必須使用一次性吸頭，在吸取不同的試劑時需更換 吸頭；

• (b)實驗之前須檢查各種實驗器具是否潔凈，必須使用潔凈實 驗器具，以避免污染干擾實驗結果；

• (c)實驗過程中【請使用紅色記號筆】進行標記，勿用藍色及 黑色記號筆（其成分含有結晶紫與本試劑盒有交叉反應） 進行標記，以免影響檢測結果；

• (d)未處理的樣本需冷凍環境-20℃保存； (e)處理好的樣本應立即用于檢測。

  
  

組織（魚肉、蝦肉）?

• 用均質器均質樣本；?

• 稱取2.0±0.05g樣本至50mL聚苯乙烯離心管中，先加入?2 1mL去離子水，再加入10mL乙腈，振蕩混勻2min；

• 加入2g樣本提取劑A，再加入2g樣本提取劑B，最后加入 1mL樣本提取液，振蕩混勻3min；?

• 室溫4000r/min離心5min；

• 取上清液2mL至干燥潔凈的離心管中，加入50μL氧化劑， 用移液器吸頭反復吸打幾次使氧化劑分散【注意更換吸 頭】，置于50℃氮氣流下吹干；

• 加入1mL樣本稀釋液，劇烈振蕩混勻2min；?

• 取50μL用于分析。 稀釋倍數：3 倍

  
  

孔雀石綠ELISA快速檢測試劑盒使用步驟

• 將所需試劑從冷藏環境中取出，置于室溫（20~25℃）平衡30min 以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

• 取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中 并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于 2～8℃?！厩?勿冷凍】。

• 洗滌液在使用前也需回溫。

• 編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做 2 孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

• 加標準品/樣本：加入標準品或樣本 50μL 到對應的微孔中， 然后加入孔雀石綠抗試劑 50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋 板膜蓋板后置于 25℃避光環境中反應 15min。

• 洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用洗滌液 250μL/ 孔，充分洗滌 4～5 次，每次間隔 10s，在吸水紙上拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。

• 加酶標物：加入孔雀石綠酶標物 100μL/孔，輕輕振蕩混勻， 用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環境中反應 15min，然后取 出重復洗板步驟 6。

• 顯色：加入底物液 A 液 50μL/孔，再加入底物液 B 液 50μL/ 孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環境中 反應 15min。

• 測定：加入終止液 50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀 于 450nm 處（建議用雙波長 450/630nm 檢測，請在 5min 內讀完數據），測定每孔 OD 值。(若無酶標儀，則不加 終止液用目測法可進行判定)。

• 結果判定 請使用專業分析軟件進行計算，更便于大量樣本的準確、

孔雀石綠ELISA快速檢測試劑盒常見問題

• 試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導致所有標準的 OD 值偏低。

• 在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況，則會出現標準曲 線不成線性，重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即 進行下一步操作。

• 每加一種試劑前需將其搖勻。

• 反應終止液為 2M 硫酸，避免接觸皮膚。

• 不要使用過了有效期的試劑盒；也不要使用過了有效期的 試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引 起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

• 儲存條件 保存試劑盒于 2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標板微孔板 放進錫箔袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏 感，因此要避免直接暴露在光線下。

• 試劑變質的跡象 發色試劑有任何顏色表明發色劑變質，應當棄之。0 標準 的吸光度（450/630nm）值小于 0.5（A450nm<0.5）時，表示 試劑可能變質。

• 加入底物液 A 液和底物液 B 液后，一般顯色時間為 15min 即可。若顏色較淺，可延長反應時間到 20min。反之，則 減短反應時間。

• 濃縮洗滌液如有結晶屬正?，F象，請加熱溶解后使用。

• 該試劑盒最佳反應溫度為 25℃，溫度過高或過低將導致 檢測吸光度值和靈敏度發生變化。