2024-05-16 17:29瀏覽量:190
磺胺類快速檢測卡采用了熒光側向免疫層析(Fluorescent Lateral Flow,FLF)方法學原理,這是一種結合了免疫學和色譜技術的檢測方法。
下面我將詳細解釋其工作原理:
樣品與抗體的結合:當將待測樣品滴加在試紙條的加樣區時,樣品中的磺胺類分子會與結合墊中的熒光微球標記磺胺類抗體發生特異性結合。這種結合是通過磺胺類分子與磺胺類抗體之間的抗原-抗體反應實現的。
毛細作用下的層析:結合后的磺胺類分子-熒光微球標記抗體復合物在毛細作用下向前移動,經過試紙條上的層析材料。層析材料通常是一種具有多孔結構的載體,它能夠使樣品中的不同組分按照一定的速率分離和遷移。
抗原-抗體結合反應:當復合物移動到檢測區(T線)時,檢測線上固定的磺胺類抗原會與剩余未結合的熒光微球標記磺胺類抗體結合,形成抗原-抗體復合物。這個過程中,熒光微球作為信號標記物,使得復合物能夠被熒光讀數儀檢測到。
熒光信號與磺胺類濃度的關系:檢測線T線上結合的熒光微球標記磺胺類抗體的量與樣品中磺胺類的濃度成反比。也就是說,當樣品中磺胺類的濃度較高時,更多的磺胺類分子會與抗體結合,導致檢測線上結合的熒光微球標記抗體減少,熒光信號減弱。相反,當磺胺類濃度較低時,檢測線上的熒光信號會相對較強。
熒光讀數儀的讀取與計算:層析結束后,使用熒光讀數儀分別讀取T線和C線(質控線)的熒光強度。質控線的熒光強度用于驗證檢測過程的有效性。然后,通過計算T/C值(即檢測線與質控線熒光強度的比值),結合儀器內置的標準曲線,即可計算出樣品中磺胺類的含量。
陰陽性的判斷:根據計算出的磺胺類含量與預設的閾值進行比較,可以判斷樣品是否呈陽性(即含有磺胺類)或陰性(不含磺胺類)。
磺胺類熒光定量快速檢測卡主要適用于快速定量檢測各類樣品中磺胺類的殘留濃度。具體來說,其適用范圍包括但不限于以下幾個方面:
乳品:檢測乳品中的磺胺類殘留,確保乳品質量安全。
畜禽、水產:適用于畜禽肌肉、肝臟、魚肉、蝦肉等組織中的磺胺類藥物殘留篩查,保障畜禽和水產品的食品安全。
蜂蜜、飼料:同樣可用于檢測蜂蜜和飼料中的磺胺類殘留,確保這些產品的安全和合規性。
這種磺胺類熒光定量快速檢測試紙條具有操作簡便、快速、靈敏度高和特異性強的優點,廣泛應用于食品安全、環境監測和藥物殘留檢測等領域。
磺胺類熒光定量快速檢測卡的檢測流程通常包括以下步驟:
準備階段:
完整閱讀使用說明書,確保了解所有操作步驟和注意事項。
將未開封的檢測卡和待檢樣本溶液回復至常溫。
加樣:
從包裝袋中取出檢測卡后盡快使用。
將檢測卡平放,用滴管吸取待檢樣品溶液,垂直滴加3~4滴(根據具體說明書的指導量)于加樣孔中。
計時與等待:
加樣后開始計時,等待層析反應發生。
讀取結果:
結果應在規定的時間內讀取,通常為5~10分鐘。超過15分鐘后判讀可能無效。
讀取結果時,檢測卡應水平置于觀察者正面。
觀察檢測卡上的T線(測試線)和C線(質控線)的顯色情況。
結果判斷:
陰性(-):T線顯色,表明樣品中磺胺類濃度低于檢測限或不含磺胺類殘留。
陽性(+):T線無顯色或顏色極淺,表明樣品中磺胺類濃度高于檢測限。
無效:未出現C線,可能操作不當或檢測卡已失效。在此情況下,應再次仔細閱讀說明書,并用新的檢測卡重新測試。
記錄與報告:
記錄檢測結果,并根據需要打印或保存檢測報告。
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