2024-05-15 14:50瀏覽量:100
新霉素介紹
新霉素為氨基糖甙類抗生素的一種,對革蘭氏陰性菌具有較強的抑制作用,所以臨床上廣泛應用。由于新霉素具有耳毒性和腎毒性,因此我國農業部規定了新霉素的最高殘留限量。 本試劑盒是應用ELISA技術研發而成的檢測產品,具有快速、簡便、準確和靈敏度高等優點,能減少操作誤差和工作強度。
新霉素Elisa試劑盒原理
新霉素Elisa快速檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔條上預包被新 霉素抗原,樣本殘留的新霉素和微孔條上預包被的抗原競爭抗新霉素的抗體,加入酶標二抗,經 TMB 底物顯色,樣本吸光 度值與其殘留物新霉素呈負相關,與標準曲線比較再乘以其對 應的稀釋倍數,即可得出樣本中新霉素的含量。
新霉素Elisa試劑盒適用范圍?
可定性、定量檢測動物組織中新霉素的含量。
新霉素Elisa試劑盒檢測步驟?
1、將所需試劑從冷藏環境中取出,置于室溫(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。若試 劑中有晶體析出,回溫溶解后方可使用。?
2、取出需要數量的微孔板,將不用的微孔放入錫箔袋,保存 于 2~8℃。?
3、洗滌液在使用前也需回溫。?
4、編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做 2 孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。?
5、加標準品/樣本:加標準品或樣本50μL 到對應的微孔中, 然后加入新霉素酶標物 50μL/孔,再加入新霉素抗試劑 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置于 25℃避光環境中反應 30min。?
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用洗滌液250μL/ 孔,充分洗滌 4~5 次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。?
7、顯色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加入底物液 B 液 50μL/ 孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置 25℃,避光環境中反應 15min。?
8、測定:加入終止液 50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于450nm 處(建議用雙波長 450/630nm 檢測,請在 5min 內讀完數據),測定每孔 OD 值(若無酶標儀,則不加終止液用目測法可進行判定)。
新霉素Elisa試劑盒注意事項?
1、室溫低于 20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導 致所有標準的 OD 值偏低。?
2、在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行 下一步操作。?
3、每加一種試劑前需將其搖勻。?
4、反應終止液為 2M 硫酸,避免接觸皮膚。?
5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。?
6、儲存條件:保存試劑盒于 2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進錫箔袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。?
7、試劑變質的跡象:底物液有任何顏色表明底物液變質,應當 棄之。0 標準的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5) 時,表示試劑可能變質。?
8、加入底物液 A 液和底物液 B 液后,一般顯色時間為 15min 即可。若顏色較淺,可延長反應時間到 20min。反之,則減短反應時間。?
9、濃縮洗滌液如有結晶屬正常現象,請加熱溶解后使用。?
10、該試劑盒最佳反應溫度為 25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
貯藏條件及有效期
貯藏條件:保存試劑盒于 2~8℃。
有效期:該產品有效期為 12 個月。