2024-06-13 10:13瀏覽量:150
地克珠利和托曲珠利屬于三嗪類抗球蟲藥,具有高效抗球蟲能力,廣泛應用于畜牧業中,尤其防治雞球蟲病。抗球蟲藥可能在動物組織中殘留,并通過食物鏈危害消費者健康,甚至危及生命。
為保障消費者安全,控制地克珠利和妥曲珠利在動物性食品中的殘留迫切需要建立靈敏、高效的三嗪類藥物殘留檢測技術。
基于此,本實驗參考國家標準征求意見稿,采用固相萃取結合液相色譜串聯紫外檢測器的方法,建立了豬肉中地克珠利和托曲珠利砜殘留量的檢測方法。
樣品經乙腈提取,正己烷脫脂,PuriTest Alumina B固相萃取柱凈化,Robussil C18色譜柱分離,0.3%乙酸水和乙腈為流動相進行梯度洗脫,外標法進行定量。
美正實驗結果表明,地克珠利和托曲珠利砜殘留量添加量為0.05mg/kg時,回收率為75%-100%,能夠滿足檢測要求。
01實驗部分
樣品提取
稱取豬肉5 g,置于50 mL離心管中,加入無水硫酸鈉5 g,乙腈10 mL,渦旋混勻,中速振蕩10 min,3000 r/min離心5 min,取上清液移至分液漏斗中,加正己烷30 mL,振搖1 min,靜置約15 min,分離乙腈層。殘余物再按上述步驟重復提取一次,乙腈層經同一份正己烷分配,振搖1 min,靜置約15 min,分層,合并乙腈層于60℃氮吹至近干,殘渣加入95%乙腈溶液5 mL,渦旋混勻,為備用液。
樣品凈化
堿性氧化鋁固相萃取柱用95%乙腈溶液10 mL活化,備用液全部過柱,用95%乙腈溶液3 mL洗滌裝備用液的離心管并過柱,不收集,用80%乙腈溶液7 mL洗脫,收集于10 mL離心管內,在60℃下氮吹至干,加乙腈-0.3%乙酸溶液1 mL,渦旋1 min,超聲2 min,混勻后過0.45 μm Nylon濾膜,供液相色譜儀檢測。
02色譜條件
色譜柱:Robussil C18,4.6 × 250 mm,5 μm;
流動相A:0.3%乙酸水;
流動相B:乙腈;
柱 ?溫:30℃;
波??長:270 nm;
進樣量:50 μL;
流 ?速:1.0 mL/min;
流 ?速:1.0 mL/min;
梯度洗脫:
液相色譜梯度洗脫條件
03實驗結果
豬肉中地克珠利和托曲珠利砜殘留量實驗結果(添加水平0.05 mg/kg,n=3)
04實驗譜圖
250?μg/mL?
地克珠利和托曲珠利砜殘留量標準溶液色譜圖
豬肉基質空白色譜圖
0.05 mg/kg豬肉基質加標色譜圖
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