ELISA试剂盒-检测试纸条-快速检测卡-山东美正生物科技有限公司

草甘膦，化學(xué)名稱為N-(磷酸甲基)甘氨酸，化學(xué)式為C3H8NO5P，是一種內(nèi)吸傳導(dǎo)型廣譜滅生性除草劑。由于草甘膦及其代謝物具有強極性，且缺少發(fā)色和熒光基團(tuán)，故普通方法檢測難度較大。

現(xiàn)行的國抽方法為《SN/T 1923-2007 進(jìn)出口食品中草甘膦殘留量的檢測方法 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》，樣品通過小柱凈化，減壓旋蒸，調(diào)pH，衍生化，用普通的C18柱液質(zhì)檢測即可實現(xiàn)定量。

為滿足廣大實驗老師的需求，美正特開發(fā)草甘膦專用柱（產(chǎn)品ID：CSS0453），優(yōu)化國抽方法，省去旋蒸和調(diào)pH等步驟，可實現(xiàn)回收率為 85 - 115%，滿足標(biāo)準(zhǔn)檢測要求。

實驗過程

稱量提取

稱取1g茶葉置于50 mL離心管中，加10μg/mL同位素內(nèi)標(biāo)溶液100 μL，加入20mL水，渦旋2min，超聲30 min，4000 r/min，離心5 min。

溶液萃取

量取10mL上層水溶液至另一離心管中

向此水溶液中加入10mL二氯甲烷，手動混勻2min，4000 r/min 離心5min，上層水溶液全部取出，轉(zhuǎn)移至新的離心管中

向此水溶液中加入10mL二氯甲烷，重復(fù)萃取一次，之后上層水溶液待凈化

凈化

用5mL 甲醇，5mL水對草甘膦專用柱進(jìn)行活化

小柱抽干

取2mL上層水溶液加入到專用柱上，棄去前1mL流出液，收集剩余流出液

衍生

準(zhǔn)確吸取1mL凈化后的液體，加入400μL 5%硼酸鹽緩沖溶液，混勻。

加入150μ 10g/L ?FMOC-Cl 丙酮溶液，混勻，室溫下避光衍生1h，加入2mL 乙酸乙酯，渦旋混勻1min

在-5℃下，10000 r/min 冷凍離心5 min，取下層水溶液過 0.22 μm Nylon 針式過濾器上機待測。

注：若經(jīng)過濾后的樣品依舊渾濁，可嘗試10000 r/min 離心 5 min（-5℃）。

色譜及質(zhì)譜條件

色譜柱：C18，2.1 × 100 mm，1.7 μm；

流動相A：含乙酸銨的0.1%甲酸水溶液；

流動相B：0.1%甲酸乙腈；

柱 溫：35℃；

進(jìn)樣量：20 μL；

流速：0.3 mL/min；

梯度洗脫：

液相色譜梯度洗脫條件

離子源：ESI+；

霧化氣壓力：45 psi；

電噴霧電壓：5500 V；

離子源溫度：450℃；

簾氣壓力：25 psi；

輔助氣壓力：45 psi；

采集方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)。

草甘膦殘留量質(zhì)譜參數(shù)

實驗譜圖

50 ng/mL草甘膦殘留量標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

茶葉基質(zhì)空白色譜圖

1 mg/kg茶葉基質(zhì)加標(biāo)色譜圖

實驗結(jié)果

由下表可知，采取固相萃取結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測草甘膦殘留量，加標(biāo)回收率為85%?- 115%，能夠滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。

茶葉中草甘膦殘留量實驗結(jié)果

（添加水平1 mg/kg，n=3）

相關(guān)產(chǎn)品